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Tabelle 1 In-vitro-Testverfahren zur Erfassung hormonaktiver Wirkungen. Die folgende Tabelle gibt nur einen Ausschnitt an verwendeten In-vitro-Verfahren nach einer zeitlich begrenzten Literaturrecherche wieder. Die Angaben erfolgten als Probenkonzentrationen; E01 steht für 101, E02 steht für 102 usw.

From: Identifikation geeigneter Nachweismöglichkeiten von hormonaktiven und reproduktionstoxischen Wirkungen in aquatischen ÖkosystemenIdentification of reliable test procedures to detect endocrine disruptive and reproduction toxic effects in aquatic ecosystems

Abkürzung

Organismus/System

Endpunkte

Organisationslevel

Versuchs-dauer

LOEC

oder ECx

EC 50

EC max

Einzel-

substanz

Umwelt-

probe

Referenz

 

Biosensoren

         
 

Rezeptorbindungsassays

        
 

Rekombinante Hefeassays

        
 

Proliferationsbestimmung

        
 

Rekombinante zelluläre assays

        
 

In vitro- Biomarker

         
 

Steroidgenese und Aromataseaktivität

        

AWACCS

Biosensor aus dem AWACSS-Projekt

verschiedene Umweltschadstoffe werden in einem vollautomatisierten Immunoassay im unteren ng/l Bereich detektiert

molekular

X

X

(Proll 2005)

Biosensor

nanomechanischer Transducer detektiert EDC

molekular

2,72 ng/l E2

2,72 E04 ng/l E2

X

 

(Dutta et al. 2007)

Biosensor

lumineszente Hefezellen mit ER-α werden vom Glasfaser-optischen Biosensor erfasst

zellulär

2,5 h

80 ng/l E2;

0,6 ng/l EE2

640 ng/l E2; 390 ng/l EE2

X

X

(Fine et al. 2006)

AR

Androgenrezeptorbindungsassay

Verdrängung von 3H-R1881 an Schimpansen-Androgenrezeptor

molekular

600 ng/l DHT

X

 

(Hartig et al. 2008)

AR

Androgenrezeptorbindungsassay

Verdrängung von 3H-R1881 an Ratten-Androgenrezeptor

molekular

1200 ng/l DHT

X

 

(Hartig et al. 2008)

AR

Androgenrezeptorbindungsassay

Verdrängung von 3H-R1881 an einem humanen Androgenrezeptor

molekular

7300 ng/l DHT

X

 

(Hartig et al. 2008)

ER

Östrogenrezeptorbindungsassay

Verdrängung von 3H-E2 an dem humanen Östrogenrezeptor-alpha

molekular

953 ng/l E2; 889 ng/l EE2

X

 

(Gutendorf und Westendorf 2001)

ER

Östrogenrezeptorbindungsassay

Verdrängung von 3H-E2 an dem humanen Östrogenrezeptor-beta

molekular

17,7 E03 ng/l E2;

13,4 E03 ng/l EE2

X

 

(Gutendorf und Westendorf 2001)

ER

Östrogenrezeptorbindungsassay

Verdrängung von 3H-E2 an einem humanen Östrogenrezeptor

molekular

2,7 E02 ng/l E2

2,7 E04 ng/l E2

X

 

(Körner et al. 1997)

ER

Östrogenrezeptorbindungsassay

Verdrängung von 3H-E2 an einem humanen Östrogenrezeptor

molekular

272 ng/l E2

1,36 E03 ng/l E2

X

X

(Murk et al. 2002)

ELRA

Enzyme-Linked-Receptor-Assay

Agonistische und antagonistische Bindung an dem humanen Östrogenrezeptor alpha

molekular

4 h

EC20= 36 bis 61 ng/l E2

191-243 ng/l E2

 > 10 E03 ng/l E2

X

X

(Kase et al. 2007, Kase et al. 2008, Seifert 1999, Seifert et al. 1999)

YAS

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines androgennabhängigen Reportergens für hAR

zellulär

2 ng/l DHT

 

X

(Thomas et al. 2002)

YES

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

EC10= 2,72 ng/l E2

27,2 ng/l E2

X

 

(Legler et al. 2002)

YES

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

81 ng/l E2

X

X

(Garcia-Reyero 2001)

YES

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

10,6 ng/l E2;

10,7 ng/l EE2

41,7 ng/l E2;

51,6 ng/l EE2

X

 

(Belt et al. 2004)

YES

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

2,72 ng/l E2

27,2 ng/l E2

X

X

(Murk et al. 2002)

YES

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

65,9 ng/l E2

X

X

(Nelson et al. 2007)

YES

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

27 ng/l E2

2,7 E03 ng/l E2

X

 

(Körner et al. 1997)

YES

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

57 ng/l E2; 86 ng/l EE2

X

 

(Folmar et al. 2002)

YES

rekombinant veränderte Hefezellen

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

218 ng/l E2; 54,5 ng/l E2; 148 ng/l EE2; 17,8 ng/l EE2

X

 

(Andersen et al. 1999)

 

mit Plasmiden transformierte Hefezellen des Stammes BMA64-1A

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion

eines androgenabhängigen Reportergens für hAR

zellulär

14,42 ng/l T

2884 ng/l T

X

X

(Michelini et al. 2005)

rt-YES

rekombinant veränderte Hefezellen mit Regenbogenforellen-Östrogenrezeptor

Messung einer Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für rt-ER

zellulär

4,93 E03 ng/l E2

X

 

(Kunz et al. 2006b)

MCF-7

humane Brustkrebszelllinie

Messung der Zellproliferation einer humanen Brustkrebszelllinie

zellulär

144 h

0,27 ng/l E2

27 ng/l E2

X

 

(Andersen et al. 2002)

MCF-7

humane Brustkrebszelllinie

Messung der Zellproliferation einer humanen Brustkrebszelllinie

zellulär

144 h

1,4 ng/ l E2; 1,19 ng/l EE2

X

 

(Gutendorf und Westendorf 2001)

MCF-7

humane Brustkrebszelllinie

Messung der Zellproliferation einer humanen Brustkrebszelllinie

zellulär

144 h

0,27 ng/l E2

2,7 ng/l E2

27 ng/l E2

X

 

(Körner et al. 1997)

MCF-7

humane Brustkrebszelllinie

Messung der Zellproliferation einer humanen Brustkrebszelllinie

zellulär

144 h

8,7 ng/l E2; 5 ng/l EE2

  

(Folmar et al. 2002)

MCF-7

humane Brustkrebszelllinie

Messung der Zellproliferation einer humanen Brustkrebszelllinie

zellulär

144 h

0,163 ng/l E2;1,91 ng/l E2; 0,0272 ng/l E2

X

 

(Andersen et al. 1999)

MCF-7

humane Brustkrebszelllinie

Messung der Zellproliferation einer humanen Brustkrebszelllinie

zellulär

144 h

14,5 ng/l E2

X

X

(Nelson et al. 2007)

durch Tranfektion veränderte Brustkrebszelllinie

Messung einer Luziferaseaktivität und Galaktosidaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER

zellulär

2,7 ng/l E2

2724 ng/l E2

X

 

(Anderson et al. 2002)

MVLN

durch Transfektion veränderte Brustkrebszellen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion

Eines östrogenabhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

144 h

0,8 ng/l E2

4,1 ng/l E2

X

 

(Belt et al. 2004)

MVLN

durch Transfektion veränderte Brustkrebszellen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion

Eines östrogenabhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

144 h

1,4 ng/l E2; 1,19 ng/l EE2

X

 

(Gutendorf und Westendorf 2001)

ER-Calux

humane rekombinant veränderte Brustkrebszellen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

 > 48 h

EC10= 0,14 ng/l E2

1,63 ng/l E2

X

X

(Legler et al. 2002)

ER-Calux

humane rekombinant veränderte Brustkrebszellen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

 > 48 h

0,136 ng/l E2

1,63 ng/l E2

X

X

(Murk et al. 2002)

ER-Calux

humane rekombinant veränderte Brustkrebszellen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

 > 48 h

4,3ng/l E2; 2,35 ng/l EE2

X

 

(Takeyoshi 2006)

ER-Calux

humane rekombinant veränderte Brustkrebszellen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogenabhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

 > 48 h

3,27 ng/l E2

X

X

(van der Linden et al. 2008)

AR-Calux

humane rekombinant veränderte Brustkrebszellen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion eines androgenabhängigen Reportergens für einen hAR

zellulär

 > 48 h

92,9 ng/l DHT

X

X

(van der Linden et al. 2008)

T-47D-Kblue C

humane rekombinant veränderte Brustkrebszellinie T-47D-KblueC

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogen abhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

 > 48h

0,272 ng/l E2

0,817 ng/l E2

27,23 ng/l E2

X

 

(Wilson et al. 2004)

TA-Assay

hER-HeLa-9903-Zelltest

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion eines östrogen abhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

> 3 h

2,23ng/l E2; 1,68 ng/l EE2

  

(Takeyoshi 2006)

HGELN

mit Plasmiden veränderte HeLa-Zellen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion

eines östrogen abhängigen Reportergens für hER alpha

zellulär

10,9 ng/l E2; 2,07 ng/l EE2

X

 

(Gutendorf und Westendorf 2001)

RTG-2

Regenbogenforellen-Gonaden-Zellen mit ER-alpha abhängigen Reportergen

Messung einer Luziferaseaktivität als Maß für die Induktion

eines östrogen abhängigen Reportergens für ER alpha

zellulär

14 ng/l E2;

1,48 ng/l EE2

90 ng/l E2; 26,7 ng/l EE2

2,72 E03 ng/l E2

X

X

(Ackermann et al. 2002a)

Amphibien- Hepatozyten

Hepatocyten vom südafrikanischen Krallenfrosch (Xenopus laevis)

m-RNA-Induktion für Vitellogenin durch östrogene Substanzen

zellulär

36 h

272,4 ng/l E2

2,72 E05 ng/l E2

X

 

(Kloas et al. 1999)

Fisch- Hepatozyten

Hepatozyten der Regenbogenforelle (Oncorhynchus mykiss)

Messung der Vitellogeninproduktion von Hepatozyten, welche durch Östrogene induziert wird

zellulär

 > 8 d

493 ng/l E2

X

X

(Jobling und Sumpter 1993)

Fisch-Hepatozyten

Hepatozyten verschiedener Fischarten

Messung der Vitellogeninproduktion von Hepatozyten, welche durch Östrogene induziert wird

zellulär

272,4 E-03 bis

272,4 E03 ng/l E2

272,4 E-02 bis

272,4 E03 ng/l E2

X

 

(Navas und Segner 2006)

H295R Steroidgenesis Assay

H295R Adrenokarzinom-Zellen

Modulation der Steroidgenese in vitro

zellulär

72 h

X

X

(Gracia et al. 2008, Hecker et al. 2007)

Aromataseaktivität humaner placentaler Microsomen

Szintillationsmessung der Aromataseaktivität

molekular

X

 

(Andersen et al. 2002)

  1. Abkürzungen: E2 = 17-β-Estradiol; EE2 = 17-α-Ethinylestradiol; T = Testosteron; DHT = Dihydrotestosteron, – = nicht aus der Literaturquelle abzuleiten oder mit anderen Referenzsubstanzen getestet