Tabelle 1 Überblick über die Durchführung der herkömmlichen Methode nach DIN und die miniaturisierte Methodendurchführung in 48-Well-Mikrotiterplatten
Übersicht über die angewandten Methoden und deren Unterscheide | DIN-Methode | Miniaturisierte Methode |
|---|---|---|
Testgefäß | Reagenzglas | 48-Well-Mikrotiterplatte |
Material des Testgefäßes | Glas | Polystyrol |
Testvolumen | 4 ml | 1 ml |
Verschlusssystem | Kapsenberg-Kappen | Permeable Klebefolien |
Anzahl der Replikate | Kontrollansatz 6 Testansatz: jeweils 3 Positivreferenz: 3 | Kontrollansatz 8 Testansatz: jeweils 5 Positivreferenz: 5 |
Inkubationsraum | Lichtthermostatschrank mit Drehgestell, Fa. Rubarth Apparate GmbH, Laatzen | Temperierbarer Klimaschrank, Fa. Aqualytik GmbH & Co., Dortmund |
Beleuchtungsmittel | Osram LF25 | Osram Basic T8, LF 640 |
Raumbeleuchtungsstärke | ca. 120 µE/m2s–1 | ca 160 µE/m2s–1 |
Temperatur | 22 ± 1 °C | 22 ± 1 °C |
Besonderheiten | – | Erhöhung der Luftfeuchte im Inkubationsraum |
Fluoreszenz-Spektrofotometer | Hitachi 2000, Hitachi Ltd., Japan; Messung in Glasküvette mit definierte Schichtdicke | TECAN Safire, TECAN GmbH, Crailsheim; direkte Messung in Mikrotiterplatte |